Дослідження методом ПЛР

Високотехнологічні лабораторні методи діагностики дають можливість виявити безліч захворювань на самих ранніх стадіях. Метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) – один з найновіших і точних методів діагностики. За його розробку вчений Кері Мулліс отримав в 1993 році Нобелівську премію. Сьогодні цей метод хоча і вважається експериментальним, але вже широко і успішно застосовується в медицині.

 

ПЛР-діагностика: суть підходу

Метод ПЛР використовує принципи молекулярної біології. Його суть полягає в застосуванні особливих ферментів, які багаторазово копіюють фрагменти РНК і ДНК збудників хвороби, які знаходяться в пробах біоматеріалу, наприклад в крові.

Після цього працівники лабораторії звіряють отримані фрагменти з базою даних, виявляють тип збудника хвороби і його концентрацію.

ПЛР проводять в ампліфікаторі – приладі, охолодному і нагрівають пробірки з пробами біоматеріалу. Нагрівання і охолодження необхідні для проведення реплікації. Точність температурного режиму впливає на точність результату.

Сфери застосування методу

Діагностичні можливості методу ПЛР величезні, з його допомогою можна виявити найрізноманітніші інфекції. Найчастіше ПЛР-метод застосовують для діагностики:

  • ВІЛ;
  • герпесу;
  • різних статевих інфекцій, зокрема хламідіозу, уреаплазмозу, гарднереллеза, мікоплазмозу та трихомоніазу;
  • кандидозу;
  • гепатитів;
  • мононуклеозу;
  • лістеріозу;
  • цитомегаловірусу;
  • туберкульозу;
  • вірусу папіломи людини;
  • кліщового енцефаліту.

Це далеко не повний список, метод ПЛР-аналізу використовується в різних областях медицини.

досліджуваний біоматеріал

Для ПЛР-діагностики захворювань на аналіз беруть різні види біоматеріалу. Вибір залежить від типу інфекції. При аналізі на ЗПСШ методом ПЛР беруть зішкріб або мазок з шийки матки або уретри, а також сечу. Для виявлення герпесу, цитомегаловірусу, гепатиту, токсоплазмозу і ВІЛ на аналіз беруть кров. При аналізі на мононуклеоз і цитомегаловірус беруть мазок із зіву. Спинномозкова рідина використовується для аналізу при ураженнях нервової системи, для діагностики внутрішньоутробних інфекцій досліджуються тканини плаценти, для виявлення легеневих інфекцій – мокрота або плевральна рідина.

Підготовка до дослідження

Підготовка до ПЛР-діагностики безпосередньо залежить від типу біоматеріалу. Кров здається натщесерце вранці. Сеча також здається вранці, в лабораторних умовах, в стерильний контейнер. Перед здачею мазка або зіскрібка з урогенітальної області не можна вступати в статеві контакти за кілька днів до дослідження, не слід проводити спринцювання. Мазок або зішкріб не можна здавати під час менструації і протягом 2-х днів після її закінчення.